トリパンブルー

トリパンブルー

IUPAC名 (3Z,3'Z)-3,3'-[(3,3'-dimethylbiphenyl-4,4'-diyl)di(1Z)hydrazin-2-yl-1-ylidene]bis(5-amino-4-oxo-3,4-dihydronaphthalene-2,7-disulfonic acid)
識別情報
CAS登録番号	72-57-1 （四ナトリウム塩）
PubChem	5904246
ChemSpider	10482308
UNII	I2ZWO3LS3M
KEGG	C19307
ChEBI	CHEBI:78897
ChEMBL	CHEMBL1640
SMILES [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)c6cc1cc(cc(N)c1c(O)c6/N=N/c2ccc(cc2C)c5ccc(/N=N/c4c(cc3cc(cc(N)c3c4O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)c(C)c5)S([O-])(=O)=O
InChI InChI=1S/C34H28N6O14S4.4Na/c1-15-7-17(3-5-25(15)37-39-31-27(57(49,50)51)11-19-9-21(55(43,44)45)13-23(35)29(19)33(31)41)18-4-6-26(16(2)8-18)38-40-32-28(58(52,53)54)12-20-10-22(56(46,47)48)14-24(36)30(20)34(32)42;;;;/h3-14,41-42H,35-36H2,1-2H3,(H,43,44,45)(H,46,47,48)(H,49,50,51)(H,52,53,54);;;;/q;4+1/p-4/b39-37+,40-38+;;;; Key: GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J InChI=1S/C34H28N6O14S4.4Na/c1-15-7-17(3-5-25(15)37-39-31-27(57(49,50)51)11-19-9-21(55(43,44)45)13-23(35)29(19)33(31)41)18-4-6-26(16(2)8-18)38-40-32-28(58(52,53)54)12-20-10-22(56(46,47)48)14-24(36)30(20)34(32)42;;;;/h3-14,41-42H,35-36H2,1-2H3,(H,43,44,45)(H,46,47,48)(H,49,50,51)(H,52,53,54);;;;/q;4+1/p-4/b39-37+,40-38+;;;; Key: GLNADSQYFUSGOU-WLILTGDCBQ Key: GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J
特性
化学式	C₃₄H₂₄N₆Na₄O₁₄S₄
モル質量	960.81 g mol⁻¹
外観	水溶液中で濃青色^[1]
融点	300 °C, 573 K, 572 °F
水への溶解度	<0.1 mg/mL^[2]
溶解度	20 mg/mL（2-メトキシエタノール）、0.6 mg/mL（エタノール）
危険性
半数致死量 LD₅₀	6200 mg/kg（経口、ラット）
特記なき場合、データは常温 (25 °C)・常圧 (100 kPa) におけるものである。

トリパンブルー（英: Trypan blue）は、染料として使われるアゾ染料（英語版）である。綿織物の直接染料（英語版）^[3]。生物科学分野では、死組織または死細胞を青色に選択的に染めるための生体染色剤（英語版）として使われている。

無傷の細胞膜を持つ生細胞または生組織は染色されない。細胞は細胞膜を通過する化合物に非常に選択的であるため、生きている細胞ではトリパンブルーは吸収されない。しかしながら、死細胞ではトリパンブルーは膜を横断する。したがって、死細胞は顕微鏡下で独特の青色として見える。生細胞は染色から排除されるため、この染色法は色素排除法とも呼ばれる。

なお、トルイジンブルー（英語版）とは異なる。

背景および化学

トリパンブルーは、オルトトリジンが持つ2つのアミノ基をジアゾ化した化合物に、それぞれ1分子ずつの1-アミノ-8-ナフトール-3,6-ジスルホン酸（1-amino-8-naphthol-3,6-disulfonic acid）がアゾカップリングした構造をしている。トリパンブルーの名前は眠り病を引き起こす寄生虫であるトリパノソーマを殺すことができることに由来する。トリパンブルーのアナログであるスラミンはトリパノソーマ症に対して薬物治療で使用されている。トリパンブルーはジアミンブルーやナイアガラブルーとも呼ばれる。

トリパンブルーに対するモル吸光係数（英語版）はメタノール中、607 nmにおいて6⋅10⁴ M⁻¹ cm⁻¹である^[4]。

トリパンレッド（ドイツ語版）およびトリパンブルーはドイツの科学者パウル・エールリヒによって1904年に初めて合成された。

使用

トリパンブルー染色を用いたシロイヌナズナ（*Arabidopsis thaliana*）の葉内のアブラナべと病菌（英語版）（*Hyaloperonospora parasitica*）の光学顕微鏡による観察。

トリパンブルーは（細胞計数のための）顕微鏡検査（英語版）や組織生存の判断のために実験用マウス（英語版）で一般的に使われる^[5]。この手法は壊死（ネクローシス）した細胞とアポトーシスした細胞を区別することはできない。

トリパンブルーは真菌の菌糸^[6]やストラメノパイル類を観察するために使うこともできる。

トリパンブルーは、連続環状嚢切開を形成する前に、成熟白内障が存在する中で視覚化を助けるため、水晶体前嚢を染めるために白内障の手術においても使われる。

20世紀初頭、トリパンブルーの動物への注入で脳と脊髄を除いた全身が染色されるという観察に基づいて、脳を保護する障壁（血液脳関門）の存在が推論された。ただし、この染料は脳瘤（英語版）といった特定の出生異常の原因となるかもしれない^[要出典]。

別称

Azidine blue 3B
Benzamine blue 3B
Benzo Blue bB
Chlorazol blue 3B
Diamine blue 3B
Dianil blue H3G
Direct blue 14
Niagara blue 3B

出典

^ TRYPAN BLUE（Colorの節を参照のこと）
^ TRYPAN BLUE（Solubilityの節を参照のこと）
^ Klaus Hunger; Peter Mischke; Wolfgang Rieper; Roderich Raue; Klaus Kunde; Aloys Engel (2005). "Azo Dyes". Ullmann’s Encyclopedia of Industrial Chemistry. Weinheim: Wiley-VCH. doi:10.1002/14356007.a03_245。
^ “Sigma-Aldrich, 60% Trypan Blue, Product page”. 2015年7月15日閲覧。
^ Strober, W (May 2001). “Trypan blue exclusion test of cell viability.”. Current protocols in immunology Appendix 3: Appendix 3B. doi:10.1002/0471142735.ima03bs21. PMID 18432654.
^ Nowicki, Marcin (15 May 2013), A simple dual stain for detailed investigations of plant-fungal pathogen interactions, Vegetable Crops Research bulletin, InHort & Versita, doi:10.2478/v10032-012-0016-z, http://www.degruyter.com/view/j/vcrb.2012.77.issue--1/v10032-012-0016-z/v10032-012-0016-z.xml?format=INT 2013年5月24日閲覧。

参考文献

ウィキメディア・コモンズには、トリパンブルーに関連するカテゴリがあります。

Chapter "Detection of Caspase Activation Combined with Other Probes of Apoptosis", Eurekah Bioscience Collection, NCBI bookshelf
Protocol for use of the dye (PDF) from Northwestern University
Wainwright, M. (December 2010). “Dyes, trypanosomiasis and DNA: a historical and critical review”. Biotechnic & Histochemistry 85 (6): 341–54. doi:10.3109/10520290903297528. PMID 21080764.